I.
1.1.1 - Os exames.
1.1.1.1. Hemograma completo.
O Exame Hemograma se destina a avaliar as células sanguíneas de um
paciente, e podemos defini-las em série branca e vermelha, contagem de
plaquetas, reticulócitos e índices hematológicos.
O exame ao ser requerido sugere uma busca de dados para diagnosticar ou
controlar a evolução de uma doença (patologia).
Na prática o hemograma é constituído pela contagem das células brancas
(leucócitos), células vermelhas (hemácias), hemoglobina (Hb), hematócrito (Ht),
índices das células vermelhas, e contagem de plaquetas.
Temos ainda o Exame Contagem de reticulócitos, também chamado de reticulócitos,
com nome formal: contagem de reticulócitos, e que tem exames relacionados: contagem
de hemácias; hemoglobina; hematócrito; hemograma; esfregaço de sangue; eritropoietina.
A contagem de reticulócitos é usada para determinar se a medula óssea
está respondendo de modo adequado às necessidades do corpo de produção de
hemácias e para esclarecer o mecanismo de diferentes tipos de anemia. Costuma ser
pedida junto com a contagem de hemácias, a hemoglobina e o hematócrito, usada
para avaliar a gravidade da anemia.
A contagem de hemácias, a hemoglobina e o hematócrito são parte do
hemograma. Este inclui uma avaliação das características das hemácias, como
tamanho, volume e forma.
Com base nesses resultados, a contagem de reticulócitos é usada para
esclarecer a causa de uma anemia. Os reticulócitos diferem das hemácias por
conterem restos de material genético (RNA) que não existe nas hemácias. Os
reticulócitos circulantes perdem esse RNA dentro de um a dois dias, tornando-se
hemácias maduras.
A contagem de reticulócitos pode ser pedida quando há diminuição do
número de hemácias, da hemoglobina e do hematócrito, e o médico quer avaliar a
função da medula óssea. Se o paciente não tem sintomas, esses achados podem
ocorrer em um exame de rotina. Esses exames também podem ser pedidos quando o
paciente apresenta sintomas como palidez, fadiga, fraqueza, falta de ar ou
sangue nas fezes.
Quando o paciente está com deficiência de ferro, de vitamina B12 ou de
folato, doença renal, supressão de medula óssea resultante de quimioterapia ou
transplante de medula óssea, ou está sendo tratado com eritropoietina, o médico
pode pedir a contagem de reticulócitos com um hemograma, em intervalos
regulares, para acompanhar a função da medula óssea e a resposta ao tratamento.
O médico quer verificar se há uma resposta adequada da medula óssea a
um aumento da necessidade de produção de hemácias.
A percentagem de reticulócitos em pessoas saudáveis é relativamente
estável. Quando o número de hemácias e o hematócrito estão diminuídos, a
percentagem de reticulócitos pode estar alta em relação ao número total de
hemácias. Para avaliar com mais precisão a função da medula óssea, a
percentagem de reticulócitos pode ser corrigida, obtendo-se uma contagem
corrigida ou índice de reticulócitos (RI).
Esse cálculo compara o hematócrito do paciente com um valor normal de
hematócrito. Algumas vezes é usado um cálculo adicional, chamado índice de
produção de reticulócitos (RPI), como correção para o grau de imaturidade dos
reticulócitos, levando em conta a velocidade de liberação dos reticulócitos na
circulação e o tempo necessário para sua maturação na corrente sanguínea. O RPI
e o tempo de maturação variam com o hematócrito.
Reticulócitos (%) = (número de reticulócitos / número de hemácias) ×
100.
Índice de reticulócitos = reticulócitos (%) × (hematócrito observado /
hematócrito normal).
Índice de produção de reticulócitos = (índice de reticulócitos) × (1 /
tempo de maturação).
Alguns contadores automatizados de reticulócitos podem relatar uma
fração de reticulócitos imaturos (IRF) e um volume médio de reticulócitos
(MRV). Esses são parâmetros de pesquisa no momento.
A contagem de reticulócitos reflete a atividade recente da medula
óssea. Se esta responde de modo adequado às necessidades de aumento de produção
de hemácias, permitirá a liberação de hemácias menos maduras na circulação, o
que aumenta o número de reticulócitos no sangue.
Quando há elevação do número de hemácias, do hematócrito e da
hemoglobina, a contagem de reticulócitos pode ser usada para determinar a
intensidade da produção excessiva de hemácias.
Um aumento da percentagem de reticulócitos pode indicar: Sangramento.
Se houver hemorragia o número de reticulócitos aumenta alguns dias
depois para compensar a perda de hemácias.
Se houver perda de sangue crônica, o número de reticulócitos pode
permanecer elevado enquanto a medula óssea supre a necessidade de novas
hemácias. Anemia hemolítica. Doença
hemolítica do recém-nascido. Caso a medula óssea seja incapaz de suprir as
necessidades, o número de reticulócitos pode permanecer normal ou apenas um
pouco aumentado, e até diminuir devido à falta de produção adequada. Se o
número de reticulócitos não se elevar com uma anemia, é provável que exista
algum grau de disfunção da medula óssea ou deficiência de eritropoietina. Diminuição
da percentagem de reticulócitos pode ser vista, por exemplo, com: Anemia por
deficiência de ferro. Anemia perniciosa
ou deficiência de ácido fólico. Anemia aplástica. Radioterapia. Inibição da
medula óssea por infecção ou por câncer. A contagem de reticulócitos indica o
que está ocorrendo, mas não diagnostica uma doença específica. É um sinal de
que é necessário investigar mais. É usada para monitorar a eficácia do
tratamento. Elevação da contagem de reticulócitos após quimioterapia transplante
de medula óssea ou tratamento de deficiências de ferro, vitamina B12 ou folato
indica recuperação da medula óssea.
A contagem de hemácias, a hemoglobina, o hematócrito e os reticulócitos
estão aumentados em doenças que causam produção excessiva de hemácias.
É importante anotar que pessoas que se deslocam para grandes altitudes
podem ter contagens de reticulócitos aumentadas enquanto o corpo se adapta ao
baixo teor de oxigênio dessas regiões. Fumantes também podem apresentar
hemácias e reticulócitos aumentados. É possível que a contagem de reticulócitos
aumente durante a gravidez. Recém-nascidos têm uma percentagem maior de
reticulócitos, que diminui para níveis normais em algumas semanas.
O método tradicional de contagem de reticulócitos é manual, em que eles
são contados ao microscópio em lâminas preparadas com uma coloração especial.
Isso está sendo substituído por métodos automatizados, que permitem contar um
grande número de células, o que aumenta a precisão do resultado.
Ferramenta de Auxílio à Identificação e Contagem de Células do Sangue
(Reticulócitos).
(Lab. Hematologia – HCPA). Objetivos: Disponibilizar
aos laboratórios de hematologia um método alternativo mais precisa e automático
de enumeração de reticulócitos utilizando processamento digital de imagens. O
problema de contagem automática de reticulócitos passa pelos seguintes
estágios: Aquisição das imagens; Pré-processamento; Segmentação; Reconhecimento;
Aquisição de Imagem.
A aquisição das imagens é feita utilizando-se o
equipamento mostrado na figura abaixo. Trata-se de um computador Pentium
Standard com uma placa comercial de aquisição de imagens conectada a uma câmara
de vídeo que está acoplada a um microscópio trinocular, onde se encontra a
lâmina com a amostra de sangue a ser analisada.

Equipamento de aquisição do Laboratório de
Hematologia do HCPA.
As imagens adquiridas são armazenadas em formato JPG
para seu posterior processamento.
Pré-processamento. Basicamente, aplicou-se um algoritmo
automático de limiarização para separar os eritrócitos do resto da imagem
(fundo). Na determinação deste limiar, utilizam-se os pontos de cruzamento das
médias crescente e decrescente do histograma de luminância das imagens.


Imagem original à esquerda e após
a limiarização.
Segmentação.
A segmentação engloba um conjunto
de técnicas dentre as quais vale salientar o processamento morfológico. As
operações de erosão e dilatação condicionadas e aplicadas em sequencia
possibilitam eliminar objetos menores (ruído), separar objetos próximos
conectados e mantendo as proporções dos objetos.


Exemplo de imagem após
limiarização à esquerda e depois de algumas erosões à direita.
Reconhecimento,
Para o
reconhecimento, aplica-se a detecção de bordas, codificação dos objetos e
extração das características importantes. Através da análise destas
características classificam-se os objetos como eritrócitos ou reticulócitos.
Resultados.
Através do
banco de mais de 2000 imagens cedido pela Patologia Clínica/Laboratório de
Hematologia do HCPA será possível testar os algoritmos de processamento de
imagem e comprovar a sua eficiência.

O Hemograma Completo consiste do hemograma mais a contagem diferencial
dos leucócitos.
Laboratório de Hematologia.
O setor de Hematologia realiza exames como Hemograma, VHS, TTP, TP,
Plaquetas e outros. Recomendável possuir
equipamentos de última geração como Analisador de células com 26
parâmetros para realização de Hemograma, equipamentos automáticos de coagulação
e VHS.
A conferência dos resultados
deve ser feita por pessoal
técnico especializado. Todos os testes alterados devem ser repetidos. No caso
do Hemograma, a repetição se faz também pela microscopia convencional.

Todos os testes realizados em
Laboratório, devem ser referendados através de Programa de Controle Externo de
Qualidade.
Um laboratório de Hematologia realiza diversos estudos no sangue, nas
áreas de Hematologia Clínica, Hemoglobinopatias, Hemostasia e Coagulação e
Controle de Qualidade de Hemocomponentes. Vamos imaginar um laboratório assim
organizado em setores. Exemplos:
Hematologia Clínica - O setor realiza os estudos hematológicos
nas amostras encaminhadas, realizando os seguintes exames/análises: Hemograma
(com contagens diferenciais e avaliações morfológicas nas distensões); Contagem de Plaquetas (Automatizado e em
Câmara de Neubauer); Contagem de Reticulócitos; VHS; Curva de Fragilidade
Osmótica; Ferritina.
Hemoglobinopatias - Desenvolve atividades com a finalidade de
diagnóstico e investigação de Hemoglobinopatias nos pacientes encaminhados
pelos ambulatórios, assim como triagem dos doadores de sangue para detectar
hemoglobinas anormais. Análises:
Hematoscopia; Contagem de Reticulócitos; Pesquisa de Inclusões
eritrocitárias; Pesquisa de Corpos de Heinz; Resistência Osmótica; Corrida
Eletroforética em pH Alcalino; Corrida Eletroforética em pH Ácido; Dosagens de
HB A, A2, FETAL, S.; Teste de Falcização.
Hemostasia e Coagulação - Realiza as provas de coagulação de
rotina, para os pacientes anticoagulados com desordem de coagulação,
encaminhados pelos ambulatórios fazendo a dosagem de fatores, inibidores da
coagulação, fibrinólise e também estudos da Agregação Plaquetária. Análises -
Estudos da Agregação Plaquetária; Tempo de Protrombina; Tempo de Tromboplastina
parcial Ativado (TTPA); Quantificação do fator de Von Willebrandt (VWF); Ensaio
de ligação do fator de Von Willebrandt ao colágeno (CBA); Tempo de Trombina;
Fibrinogênio; Fator VIII; Fator IX; Inibidores do fator VIII e IX; Proteína C;
Proteína S; Antitrombina III; Resistência a Proteína C Ativada; Anticoagulante
Lúpico.
Controle de Qualidade de Hemocomponentes - De acordo com as determinações da
legislação vigente, os Hemocentros devem encaminhar 1% dos hemocomponentes para
testes de Controle de Qualidade, a fim de atestar que os mesmos foram
processados corretamente atingindo assim os padrões por ela definidos. Análises:
Dosagem do Fator VIII; Dosagem do
Fibrinogênio.


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